第228章 100%（六更，求月票！）
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第228章 100%（六更，求月票！） 飞机终究还是准点起飞了。 江河低头看向手机。 屏幕上还停留在登机前，沈钰发来的最后一条短信： 【江医生，一路平安，记得想我。】 江河盯着那行字。 此刻感受到的却并非甜蜜。 随着飞机不断爬升，机舱内的气压发生变化，有种无所遁形的恐惧笼罩着他。 越是贪恋现在，便越是害怕失去。 癌症，癌症。 哪怕到了后世，人类依然没有彻底搞清楚这种病的发病机理。 医学界总是在强调预防，强调改善生活作息、戒烟限酒、保持心情愉悦。 可作为一名胰腺方面的顶尖医生，江河很清楚。 会不会发生癌变，什么时候发生癌变，根本就是一个巨大的黑盒。 有的人抽烟喝酒熬夜，活到九十岁无疾而终。 有的人生活作息极其规律，饮食健康，却在三十多岁被确诊为晚期癌症。 这个世界，很多时候就是这么不讲道理。 江河真的很害怕。 这种恐惧感几乎要将他摧毁。 外科手术是有极限的，哪怕他把后入路手术练到极致，手术刀依然救不了命。 就连协和一把刀钟守先教授，在一台长达九小时的复杂胰腺癌手术后，依然无法将患者救下。 不能停下。 说什么回南方之后轻松愉快，根本不可能。 和沈钰待在一起的时光越是甜蜜，越是让他确信一件事： 必须要拼命。 不仅要攻克早筛，还要研发靶向抗癌药。 必须赶在命运到来之前，做好一切准备。 江河睁开眼睛，眼神病态般决绝。 假期结束了。 我得努力，再努力。 …… 飞机降落。 陈浩打了个哈欠，转头对江河说：“老江，先回宿舍睡一觉还是怎么说？” “你回宿舍休息，我去实验室。” 陈浩愣了一下：“现在？不去吃个饭？” “不用，我不饿，你今天休息，明天按正常排班回组里。” 看着江河的背影。 陈浩抓了抓头发，嘟囔了一句：“这家伙，刚见完媳妇怎么感觉比以前更疯了……” 这样的江河他可不放心啊。 于是快步跟上道：“我陪你一起去实验室！” 半小时后，学校实验室。 大家见到江河，上来寒暄，问他京城好不好玩。 结果江河简单回了一句还行，然后就一边洗手一边问：“数据跑得怎么样了？” 大家愣了一下。 但也很快适应了江河这种变态工作狂的体质。 王晓晴教授将手里的一份报告递过去：“过去这一周，我们用健康人群的血清把底库基线又跑了三百多组，加入糖原共沉淀和双重氯仿抽提的方案非常稳定，纯度全部在1.9以上，下游的pcr扩增没有出现任何杂音。” 江河擦干手，接过报告快速扫了一眼。 数据确实很漂亮。 “顾老师那边？”江河问。 王晓晴：“昨天晚上顾教授打过电话，已经通过了海关的生物安全检疫，走的是加急冷链，算算时间，应该今天下午就能送到实验室。” 江河的眼神微微一凝。 终于来了。 这是项目最核心的部分。 也是最后的一块拼图。 “通知所有人，集合。” 下午两点四十分。 易向晚、顾亦舟、程溪瑶、唐培等人陆续赶到实验室，迅速换上了白大褂。 三点十五分。 一辆冷链运输车停在实验楼下。 两名穿着制服的工作人员抬着一个贴着封条和各类检疫标签的厚重保温箱进来。 签字，交接。 他们离开后。 江河戴上护目镜和防冻手套，拿过剪刀，剪断海关的铅封。 打开搭扣，掀开箱盖。 浓烈的白色冷气升腾而起。 拨开上层的干冰块，露出了下面整齐排列的五个冻存盒。 取出一个盒子，打开。 里面是十个微量离心管，管壁上贴着德文标签和条形码。 管底呈现出淡黄色。 五十份。 这是患者在确诊胰腺癌前两到三年，处于完全健康状态下抽取的血清。 里面有他们要找的，极早期胰腺癌的影子。 “血清到位了。” 江河将冻存盒放回干冰中，转身看向身后的团队。 他的目光从陈浩、易向晚、顾亦舟、陆晓林、蔡卓群、程溪瑶、唐培、王晓晴的脸上一一扫过。 “各位，这五十份样本，代表着五十个鲜活的生命，也代表着目前全球医学界对胰腺癌早筛的盲区。” “我们的任务，是用我们自己搭建的mirna早筛模型，从这五十份看似正常的血清中，把那个已经开始悄悄发生变化的数据，给揪出来。” “成功了，这个模型就是目前世界上唯一能提前两到三年预警胰腺癌的雷达。” “准备干活。” 所有人立刻行动起来。 实验室进入了最高强度的运转状态。 王晓晴：“水浴锅温度设定37度，准备融化样本。” 陆晓林拿着移液枪，将融化后的血清样本分装进新的离心管中。 江河站在操作台前，亲自负责最关键的提取步骤。 “trizol试剂，准备。” 蔡卓群立刻递上试剂瓶。 江河稳稳地吸取定量trizol，加入血清中，反复吹打裂解。 “室温静置五分钟。”江河看了一眼墙上的挂钟。 五分钟后。 “氯仿。” 加入氯仿，剧烈震荡十五秒，再次静置。 “上离心机。” “4摄氏度，12000g，15分钟。” 离心机启动。 这十五分钟里，没有人说话。 易向晚盯着离心机上的倒计时，咽了一口唾沫。 程溪瑶和唐培在检查下游的pcr反应液。 “滴——” 倒计时结束。 江河取出离心管。 液体已经清晰地分成了三层。 最上层是无色的水相，含有他们需要的rna。 “开始双重氯仿抽提。” 这正是他之前解决纯度问题的核心技术。 小心地吸取上清液，移入新管。 牺牲了一部分液量以避开中间层的蛋白质污染。 接着，再次加入等体积的氯仿，震荡，离心。 第二次离心结束，江河再次吸取上清液。 “糖原。” 江河伸出手。 王晓晴立刻将准备好的糖原递上。 往水相里滴入5微升浓度为5mg/ml的糖原作为共沉淀剂。 “异丙醇沉淀，负20度静置二十分钟。” 二十分钟后，再次离心。 倒掉上清液，管底出现了一个微小的白色沉淀团块。 “洗涤。” 加入75%乙醇，温和洗涤，离心，弃液。 “风干，加无酶水溶解。” 整个提取过程耗时将近两个小时。 第一批五个样本的rna提取完成。 江河拿着溶解后的样本，走到nanodrop分光光度计前。 滴入1微升样本，放下检测臂。 所有人都围了过来。 屏幕上跳出数据： 浓度：15ng/μl。 a260/280：1.95。 a260/230：2.03。 极度纯净的数据。 经历了跨国运输和反复冻融，他们依然靠这套提取工艺拿到了完美的样本。 “提取成功。”江河淡淡地说了一句，“按这个标准，把剩下的样本全部提出来，王教授，准备逆转录。” “收到。”王晓晴立刻接过样本，走向另一边的操作台。 逆转录过程相对自动化。 利用特定的茎环引物，将极其微量的mirna逆转录成a。 时间一分一秒地过去。 窗外的天色逐渐暗了下来。 没有人提议吃饭。 所有人，接力完成每一个步骤。 晚上八点。 五十份样本的a全部准备就绪。 最关键的一步到来了。 “准备上qpcr机。”江河说。 易向晚和顾亦舟将配制好的pcr反应体系小心翼翼地加入96孔板中。 每一个孔里，都包含着引物、荧光染料、a模板和酶。 这套体系，是他们之前在1万倍稀释的极端低浓度下拉出来的。 江河拿起96孔板，放入qpcr仪的反应槽中。 压下盖子。 输入参数。 设定循环程序。 “开始运行。” 机器启动。 检测过程需要两个小时。 这两个小时，对实验室里的每一个人来说，都如同世纪般漫长。 如果扩增曲线是一条平滑的直线，没有起伏，说明患者在两三年前的血液中，并没有这些特异性mirna的异常表达。 那就意味着，早筛模型失败。 如果曲线能漂亮地拉起来，并且ct值（循环阈值）在有效范围内，则证明模型成立。 江河拉过一把椅子，坐在电脑前。 他不说话，其他人也不敢说话。 易向晚在操作台边走来走去。 “你别晃了。”顾亦舟烦躁地说。 “我紧张啊师兄，万一……我是说万一，欧洲那边的血清变质了怎么办？或者我们找的那些标志物其实在极早期根本不释放？” “闭嘴。”所有人一起打断了他。 易向晚赶忙举手：“抱歉！” 第一阶段的变性、退火、延伸循环结束。 屏幕上依然是一片空白。 “怎么还没出线？”陆晓林手心已经出汗了。 蔡卓群沉声说道：“急什么，极早期的样本，浓度低，ct值肯定靠后。” 第三十个循环。 依然没有明显起伏。 第三十二个循环。 突然。 屏幕的坐标轴上，第一条曲线的尾部，出现了一个上扬角度。 所有人屏息。 第三十三个循环。 上扬的角度开始变大。 紧接着，第二条、第三条、第五条曲线…… 第三十五个循环。 屏幕上爆发出密集的扩增曲线！ 一条条平滑的对数扩增曲线，拔地而起！ 没有任何杂乱的非特异性扩增！ 而在另一侧的熔解曲线界面上，更是拉出了漂亮整齐的单峰！ “卧槽……” 易向晚直接爆了一句粗口。 王晓晴呼吸也急促起来：“内参曲线平稳，不存在加样误差……出来了，江河，和我们之前建立的300组健康基线相比，50份样本的特征mirna全部呈显著高表达！” 陈浩倒吸凉气。 陆晓林和蔡卓群对视了一眼。 五十份极早期胰腺癌血清，五十个隐藏在健康下的种子。 这意味着，他们在零八年，把癌中之王在血液中揪了出来。 这项成果，可以将癌症的发现时间，整整提前两到三年！ 江河依然坐在椅子上，脑海中的进度条跳动。 【mirna胰腺癌早筛项目进度：100%】 完成了这一步。 这直接完成了后续的百分之五十。 前世他查阅了无数文献，在实验室里熬了无数个日夜，一万次失败才换来一次稳定读数的执念。 今生从盲缝开始，一步步积累资金，招揽团队…… 这一切，终于结出果实。 他闭上眼睛。 沈钰的面容在眼前闪过。 “江医生，你回来啦，我有话想跟你说……” 江河咬牙。 这一次，不会再让你说出那句话，我保证。 “老大！！！” 易向晚猛地冲上来，从后面抱住江河：“我们成功了！！卧槽！牛逼啊！老大我们真的成功了！” 顾亦舟也冲了过来，怒吼道：“牛逼！牛逼！” 所有人都围了上来。 “我们成功了！” “完美的数据啊！！！” “拿下！拿下！” “老大，你太神了！这系统绝了！” 程溪瑶和唐培两个女生眼泪都干出来了。 连一向稳重的王晓晴教授，此刻也激动得不知道该说什么。 实验室里彻底沸腾。 大家疯了一样地庆祝，互相拥抱，拍打。 江河被他们摇晃得几乎坐不稳。 任由他们发泄着情绪，嘴角终于扬起一抹笑意。 他伸手往下压了压。 实验室里稍微安静了一些，所有人都目光灼灼地盯着他。 江河整理了一下白大褂，语气平静地说道： “数据封存，整理报告。” “兄弟们，是时候一起去巴尔的摩玩玩了。” ----------------- （ps.祝大家五一快乐！2w字更新奉上，求追读，求月票~）